Skip to content

puszczykowo endokrynolog

2 miesiące ago

622 words

Z jednej strony aktywacja PPARA za pomocą Wy14643 ograniczyła rozwój nowotworów złośliwych sutka w zapobieganiu nowotworom (47). Z drugiej strony, w linii komórkowej ludzkiego raka piersi, aktywacja PPARA sprzyja proliferacji (48). Tak więc, aby zdefiniować rolę PPARA w połączeniu z PML w naszym modelu eksperymentalnym, przeprowadziliśmy eksperymenty z utratą przywiązania w liniach komórkowych raka sutka, które zdefiniowaliśmy jako mające wysoką (MDA-MB-231) lub niską (MCF7) PML poziomy przez Western blot (dodatkowa Figura 3C). Farmakologiczne hamowanie PPARA za pomocą dostępnego w handlu związku (49) zmniejszyło żywotność komórek w obu liniach komórkowych, podczas gdy komórki o wysokiej ekspresji PML były znacząco bardziej wrażliwe (Supplemental Figure 3D). Dane te sugerują, że PPARA może mieć różne aktywności w raku sutka w sposób zależny od kontekstu (np., Zapobieganie nowotworom w porównaniu z warunkami promocji nowotworu) i że jest on wymagany, przynajmniej częściowo, do przeżycia komórki po utracie przywiązania. Proliferacja komórek raka sutka do światła pustych struktur gruczołowych została uprzednio zamodelowana in vitro przez hodowlę błon komórkowych podstawnych komórek MCF10A sutka (50). Komórki migrujące daleko od macierzy pozakomórkowej ulegają apoptozie i anoikisowi w obszarze światła w strukturze, co prowadzi do tworzenia struktur gruczołowych pustych w środku, podczas gdy promowanie FAO zapobiega temu procesowi i prowadzi do wypełnienia światła (10). Aby ustalić, czy PML odgrywałoby rolę w tym procesie, wyhodowaliśmy puste komórki MF lub komórki MCF10A wyrażające nadekspresję PML w Matrigel i oceniano apoptozę (Figura 5A) i wypełnienie światła (kryteria kwantyfikacji na Figurze 5B). Po upływie 10-12 dni struktury powstające z komórek zainfekowanych wektorem pustym wykazywały zwiększoną apoptozę w obszarze światła (fig. 5A). Zgodnie z tym większość tych struktur była pusta lub w większości przejrzysta (rys. 5, B i C). Warto zauważyć, że nadekspresja PML w komórkach MCF10A skutkowała zmniejszoną apoptozą w obszarze światła (Figura 5, A (C) w korelacji ze zwiększonym odsetkiem struktur 3D wykazujących wypełnienie światła (oznaczenie ilościowe na Figurze 5, B i C). Ponadto, w celu wykazania, że w tych działaniach PML pośredniczyła zdolność do wzmacniania FAO, hodowaliśmy w komórce Matrigel komórki MCF10A wyrażające PML i 8 dni później rozpoczęto leczenie nośnikiem lub etomoksirem. Zgodnie z oczekiwaniami, etomoksir całkowicie zahamował wypełnienie światła indukowane przez PML (Figura 5D i Suplementowa Figura 3E). Dane te dostarczają solidnych dowodów na proponowaną selektywną korzyść zapewnioną przez PML w warunkach utraty przywiązania, co jest korzystne, przynajmniej częściowo, poprzez aktywację programu FAO. Figura 5 Ekspresja PML promuje wypełnianie światła w komórkach MCF10A w sposób zależny od FAO. (A) Pozytywność kaspazy-3 w hodowlach podstawnych 3D komórek MCF10A (dzień 10 hodowli) transdukowanych za pomocą pustego retrowirusa eksprymującego PMLIV. (B) Reprezentatywne obrazy fluorescencyjne (górne panele) stosowane jako kryteria oceny ilościowej wypełniania światła komórek MCF10A z Figury 4 (dolne panele) hodowanych w Matrigel przez 10 dni. (C) Reprezentatywne obrazy komórek MCF10A z Figury 4 hodowanych w Matrigel przez 12 dni (jak w B, z niezależnej hodowli 3D). (D) Reprezentatywny schemat procedury leczenia komórek MCF10A za pomocą etomoksiru w modelu 3D. Dolne panele pokazują kwantyfikację wypełnienia światła po 14 dniach (6-dniowe leczenie za pomocą 25 .M etomoksiru). Oryginalne powiększenie, × 400. PML ulega nadmiernej ekspresji w podzbiorze agresywnych próbek raka sutka i koreluje ze złym rokowaniem oraz aktywowaną sygnalizacją PPAR. Nasze odkrycie zidentyfikowało zatem PML jako potencjalnie zapewniającą wybiórczą przewagę komórkom raka piersi przechodzącym stres metaboliczny
[patrz też: parapareza, czy sepsa jest zaraźliwa, dermatolog rawicz ]

0 thoughts on “puszczykowo endokrynolog”